Formada en Ingeniería Civil por el Instituto Superior Técnico (IST - Universidad Técnica de Lisboa), donde inició desde el principio su especialización en el área de las Infraestructuras de Carreteras. Ana Castro tiene 29 años de experiencia profesional en la ejecución y gestión de proyectos de vías de comunicación. Desde 2001 desempeña, especialmente, funciones de Coordinación de Proyectos y de Gestión de Obras, principalmente en el área de las concesiones de carreteras, realizando la integración y compatibilidad de las diferentes especialidades técnicas de los proyectos de ingeniería y el control de calidad, plazo y precio. En esta área, cabe destacar su acción como Coordinadora General de la Concesión Norte y de la Subconcesión del Duero Interior y, más recientemente, la Coordinación Técnica del Proyecto y las tareas complementarias generales del Nuevo Enlace Ferroviario entre Évora Norte y Elvas/Caia (frontera con España).
En 2010 asumió el cargo de Directora del Departamento de Gestión de Obras, desarrollando su actividad profesional en diferentes países, principalmente Portugal, Perú y Brasil.
Desde noviembre de 2016 integra el Grupo Quadrante, donde desarrolla la función de Gestora de Proyectos en el Departamento de vías de comunicación.